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难道只有抗生素一条路吗?

发布时间:2019-01-28 09:07 |  点击次数:

细胞生长变差变慢,显微镜视野中细胞周围很多小黑点,多半是支原体惹的祸!

支原体污染源很多,例如工作的环境、操作者本身带入(一些支原体在人体是正常菌种)、污染的细胞进行交叉感染等等。污染防不胜防,造成大量人力、物力和财力的浪费,是广大科研人员的腹心之疾。

今天小编就来跟大家来说说,典型的处理支原体污染的方法吧!


一、物理化学清除法

1. 清洗纯化法:主要是通过换液降低污染量,由于支原体个体小且除发酵支原体外多为细胞外寄生,所以可以使用低速离心换液和反复洗涤细胞,使得支原体数量降低到极限。

2. 辐照法:由于辐照灭菌能够彻底杀灭所有微生物。有实验证实 Co60 以 2Mrad 辐照处理各种培养基样品均达到无菌要求。辐射灭菌的培养基营养性能不低于过滤组,证明辐照灭菌对培养基和血清无不良影响。

3. 加热处理法:主要是利用支原体耐热性较差,在 56 ℃ 条件下,30 s 内半数死亡;在 45 ℃ 环境中,15~30 min 内全部死亡。以支原体和培养细胞之间对温度耐受性的差别为基础,将污染的细胞培养物在特定的温度下加热,特定的时间,从而到达清除支原体的结果。

4. 抗生素处理法:这目前清除支原体最常用的方法,主要成分是四环素类,大环内酯类(或泰妙菌素),喹诺酮类等,并且需要针对不同种的支原体,使用特定的抗生素,针对性的浓度来到达清除的效果。但支原体对大多数常用抗生素都能产生抗性,而且抗生素只能通过干扰 DNA 复制或蛋白的合成来抑制支原体污染的扩增,并不能杀伤支原体。

以喹诺酮类为例,其是以细菌的脱氧核糖核酸(DNA)为靶,妨碍 DNA 回旋酶,进一步造成细菌 DNA 的不可逆损害,而使细菌不再分裂,达到抗菌效果。


二、生物学方法

1. 特异性血清处理法:血清中含有一些天然的抗微生物成份,未灭活的血清对污染细胞中的支原体有杀灭作用。多抗血清更是可以消除细胞中的多种特定支原体。

2. 接种动物体法:如果是肿瘤细胞和杂交瘤细胞被支原体污染,则可将细胞接种到同种系动物皮下货腹腔,或接种于裸鼠腹腔,利用动物体内免疫系统杀伤支原体。

3. 巨噬细胞吞噬法:利用小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬作用,杀伤支原体。

4. 抗菌多肽:支原体和细菌表面带有正电荷,抗菌肽表面带有负电荷,通过电荷间的引力作用,抗菌肽和支原体特异性结合,作用于细胞膜,类似于打孔的方式,使得支原体裂解死亡。

附:市场上常见支原体清除产品参数比较图

 
  生产厂家 有效成分 处理时间 依耐性
MRA MP
Biochemicals
喹诺酮类衍生物(抗生素) 1 周
 
+(有依耐性)
Plasmocin™ treatment InvivoGen 大环内脂类、喹诺酮类(抗生素) 2 周 +
BM-Cyclin Roche 泰妙菌素(抗生素) 2 周 +
BIOMYC-1、2、3 Bioind 泰妙菌素、
喹诺酮类(抗生素)
BIOMYC-1、2 联合使用 10 天左右。BIOMYC-3 处理 2 周 +
MycoplasmaOUT™ Treatment Genloci(江苏吉锐) 抗菌多肽(非抗生素) 3~7 天 -(无依耐性)